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魚elisa檢測試劑盒的試驗原理和操作步驟

時間:2020-10-22 瀏覽次數:35

   魚elisa檢測試劑盒的試驗原理:
  本試劑盒采用間接競爭一步法。在酶標板中同時加入校準品(或樣本)、酶結合物及抗體,酶標板上包被的抗原與加入的校準品(或樣本)中的抗原競爭結合加入的抗體,同時酶結合物與抗體結合。用TMB底物顯色,樣本吸光值與其殘留物呋喃唑酮濃度呈負相關,與校準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數,即可得出樣本中呋喃唑酮的含量。
 
  魚elisa檢測試劑盒的操作步驟:
  從室溫平衡20min後的鋁箔袋中取出所需板條,剩餘板條用自封袋密封放回4℃。
  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;樣本孔加待測樣本50μL。
  樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  棄去液體,吸水紙上拍幹,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍幹,如此重複洗板5次。
  結果判斷繪製標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪製出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
 
  魚elisa檢測試劑盒的注意事項:
  1、測試程序開始前,將所有試劑至室溫。
  2、所有試劑使用前,應輕輕翻轉或旋轉混合,不要誘發泡沫。
  3、一旦試驗開始,應在建議的時間限製內不中斷地完成所有的後續步驟。
  4、所有試劑用完後,放好瓶塞。不要交換瓶塞。
  5、每個樣品使用單獨的一次性的吸頭,防止交叉感染。
  6、所有的樣品和標準應在同時間運行,以使所有的測試條件是相同的。
  7、不混用不同批次,不用過期試劑。
  8、在實驗過程中,檢查實驗設備的精度和準確度。

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