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植物elisa檢測試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗。往預先包被植物水楊酸(SA)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育並徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中的植物水楊酸(SA)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
植物elisa檢測試劑盒實驗前的準備工作:
1、仔細閱讀說明書。
2、檢查試劑盒標簽上的有效期,如果超過有效期,請勿使用。
3、按說明書確定所有試劑齊全。
4、標本製備要規範,每份標本體積要按2-3個複孔以上的量製備,盡量分裝做備份。
5、準備好所有實驗額外所需物品。
6、按說明書將所用試劑平衡至室溫,根據檢測標本數量確定所需試劑的量。
7、檢查試劑盒內每種試劑的貯存條件,保證所有試劑均按照試劑盒內說明書推薦的條件存儲。
8、檢查不穩定或者變質的試劑溶液。
9、保證充分的孵育時間和溫度。
10、切勿使用不同生產批號的試劑取代現有試劑或混合現有試劑。
11、在混合或溶解蛋白溶液時,避免泡沫產生。
植物elisa檢測試劑盒的操作注意事項:
1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鍾。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬於正常現象,水浴加熱使結晶完全溶解後再使用。
2.實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫幹燥)保存。
3.預處理後的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。
4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5.所有液體組分使用前充分搖勻。