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小鼠ELISA檢測試劑盒的實驗分析原理和注意事項

時間:2020-08-14 瀏覽次數:109

   小鼠ELISA檢測試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被待測標本捕獲抗原的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育並徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中的待測標本呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
 
  小鼠ELISA檢測試劑盒的定量分析實驗原理:
  本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中脂蛋白脂酶(LPL)水平。用純化的脂蛋白脂酶(LPL)抗原包被微孔板,製成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入脂蛋白脂酶(LPL),再與HRP標記的脂蛋白脂酶(LPL)抗原結合,形成抗體-抗原-酶標抗體複合物,經過徹底洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中的脂蛋白脂酶(LPL)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中脂蛋白脂酶(LPL)濃度。
 
  注意事項:
  1.從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鍾。酶標包被板開封後如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
 
  2.各步加樣均應使用加樣器,並經常校對其準確性,以避免試驗誤差。
 
  3.建議所有標準品、樣本都做雙份檢測。
 
  4.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定須以酶標儀讀數為準。
 
  5.為避免交叉汙染,要避免重複使用手中的吸頭和封板膜。

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