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人ELISA檢測試劑盒所需樣本及處理要求

時間:2020-07-28 瀏覽次數:126

   人ELISA檢測試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法。將標準品、待測樣本加入到預先包被人幽門螺旋杆菌IgM(Hp-IgM)單克隆抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間後,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間後,洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B,底物在辣根過氧化物酶催化下轉化為藍色產物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中人幽門螺旋杆菌IgM(Hp-IgM)濃度呈正相關,450nm波長下測定OD值,根據標準品和樣品的OD值,計算樣本中人幽門螺旋杆菌IgM(Hp-IgM)含量。
 
  人ELISA檢測試劑盒所需樣本及處理要求:
  1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鍾,離心20分鍾左右。仔細收集上清,保存過程中如出現沉澱,應再次離心。
 
  2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鍾後,離心20分鍾左右。仔細收集上清,保存過程中如有沉澱形成,應該再次離心。
 
  3.尿液:用無菌管收集,離心20分鍾左右。仔細收集上清,保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
 
  4.細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鍾左右。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反複凍融,以使細胞破壞並放出細胞內成份。離心20分鍾左右。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。
 
  5.組織標本:切割標本後,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鍾左右。仔細收集上清。分裝後一份待檢測,其餘冷凍備用。
 
  6.標本采集後盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放於-20℃保存,但應避免反複凍融.
 
  7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑製辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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